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제가 선택배지와 분별배지에 대해 설명할 때 항상 예로 설명하는 배지가 하나 있습니다. 바로 MacConkey agar 배지입니다.

(맥콘키...) MacConkey agar 배지는 선택배지와 분별배지의 목적을 모두 가지고 있는 배지입니다.

MacConkey agar 배지의 조성은 아래와 같습니다.

(※ 제조사마다 조성물은 같으나 함.유.량은 약간 다를 수 있습니다.)

위의 MacConkey agar 배지의 조성 중 빨간색으로 된 조성물들이 선택 및 분별배지의 역할을 하게됩니다.

먼저 Bile salts와 Crystal violet은 gram-positive 미생물의 생장을 저해하기 때문에 gram-negative 미생물만 생장할 수 있으며,

이러한 성질은 선택배지의 역할을 하게 됩니다. Neutral red는 pH indicator이죠

Neutral red는 pH 6.8 ~ 8.0 의 변색 영역을 지니고 있으며 산성이 되면 붉은색을 띄게 됩니다

MacConkey agar 배지에서 생장한 gram-negative 미생물이 lactose를 발효하여 유기산을 생성하게 되면

이로 인해 배지의 pH가 산성으로 변하여 배지가 붉게 변하게 됩니다. 

이를 통해서 lactose를 발효하여 유기산을 생성할 수 있는 미생물과 그렇지 못한 미생물을 구분해줌으로써 분별배지의 역할을 하게 됩니다.

아래의 사진에는 MacConkey agar 배지에 4 종의 균을 접종하여 배양한 결과입니다. 

1, 2, 4 번은 미생물이 성장하였지만 3 번은 성장하지 못했습니다. 선택배지의 역할을 통해 

1, 2, 4 번의 생장한 미생물들은 gram-negative이고, 3번의 미생물은 gram-positive 임을 알 수 있습니다.

또한 생장한 1, 2, 4 번의 미생물들 중, 1, 2번 미생물만 붉게 변하고 4 번의 미생물은 색의 변화가 관찰되지 않았습니다.

분별배지의 역할을 통해 1, 2 번의 미생물은 lactose를 발효하여 유기산을 생성하지만, 4 번의 미생물은 그렇지 못하는 것을 알 수 있습니다.

후에 미생물학을 공부하다 보면 selection과 screening의 개념을 배우실텐데 

selection은 선택배지를, screening은 분별배지를 연관지어 생각하시면 쉽게 이해하실 수 있을 것입니다.

재료 및 성분 (1 L; Trypticase soy agar + blood)

Pancreatic Digest of Casein                 15g

Papaic Digest of Soybean Meal            5g

Sodium Chloride                               5g

Agar                                              15g

Blood                                             50g

실험 준비물은 생략하겠습니다.

500ml 기준으로 작성되었습니다.

1. agar powder 를 7.5g 맞추어줍니다

2. D/W를 500ml 준비합니다.

3. 준비한 agar powder 와 D/W 를 mix 시켜줍니다

(기계 혹은 손으로 녹여주시면되는데 장비가없는경우 전자렌지를 통해 녹여주시면됩니다)

실험 기준으로 20~30초 돌렸으며 2회 시행하였습니다.

4. Autoclave 121도 15분 시행합니다.

5.Autoclave후 agar의 온도는 45도를 유지합니다

(여기서 온도가높으면 초콜렛배지가됨)

6.Blood mixing

7. petridish 20ml 분주

8. Open Plates (약 15~20분 굳습니다)

(Tip : 알코올 램프를 통해 조금더 빨리 굳게만들수있습니다)

참고자료: http://blog.naver.com/juny3434/50032890594