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혈액 ,수혈 실습 계획서.pptx

14 남서 혈액 수혈 실습 계획서

8. RBC count : Anemaia, leukemia 진단

① 0.85% NaCl, Hayem's Sol. Gawor's Sol. Dacie's Sol. Strong's Sol. Toison's Sol.

② Hayem's solution : Sod. sulfate(Na2SO4), Sod. chloride(NaCl), Mercuric chloride(HgCl2), D.W

③ Gower's solution : Sod. sulfate, Glacial acetic acid, D.W

④ 희석 pipette에 0.5눈금까지 혈액 흡입하고 101까지 희석액을 흡입 → 200:1 희석

cf> 빈혈이 심할 경우 100 : 1로 희석한다.

⑤ 계산 : R × 25/5 × 10 × 200 = R × 10000 = 1mm3

* 계산 후 20개 이상 차이시 다시 조작.(×400검경)

⑥ 정상치 : 남자 450~500만개/mm3, 여자 400~450만개/mm3

9. WBC count : 적혈구를 용혈시켜야 한다.

① 2% acetic acid, 1% Hydrochloric acid(0.1N HCl)

② Turk's solution : Glacial acetic acid(적혈구 파괴 시약), Gentian violet CWB(염색), D.W(희석효과)

③ 희석 파이펫에 0.5눈금까지 혈액 흡입. 11까지 희석액 흡입 (20:1 희석)

④ 계산 : W × 10 × 20 × 1/4 = W × 50 = 1mm3(㎕)

* 계산 후 12개 이상 차이시 다시 조작(×100검경)

⑤ 정상치 : 성인 4000~10000/mm3, 어린이 9000~40000개/mm3

cf> 희석 pipette - 혈구 희석 또는 일정량(20㎕)의 혈액채취를 목적으로 만들어진 pipette

파이펫 세척 방법 : D.W → Alcohol → Ether(Acetone)

⑥ 유핵 적혈구에 대한 보정

100

Corrected WBCs = uncorrected WBCs × ---------------------------

100WBCs + nRBCs

http://m.cafe.daum.net/laboratoryseouhealth/Tk3L/15?listURI=%2Flaboratoryseouhealth%2F_rec%3FboardType%3DM

8. RBC count : Anemaia, leukemia 진단

① 0.85% NaCl, Hayem's Sol. Gawor's Sol. Dacie's Sol. Strong's Sol. Toison's Sol.

② Hayem's solution : Sod. sulfate(Na2SO4), Sod. chloride(NaCl), Mercuric chloride(HgCl2), D.W

③ Gower's solution : Sod. sulfate, Glacial acetic acid, D.W

④ 희석 pipette에 0.5눈금까지 혈액 흡입하고 101까지 희석액을 흡입 → 200:1 희석

cf> 빈혈이 심할 경우 100 : 1로 희석한다.

⑤ 계산 : R × 25/5 × 10 × 200 = R × 10000 = 1mm3

* 계산 후 20개 이상 차이시 다시 조작.(×400검경)

⑥ 정상치 : 남자 450~500만개/mm3, 여자 400~450만개/mm3

9. WBC count : 적혈구를 용혈시켜야 한다.

① 2% acetic acid, 1% Hydrochloric acid(0.1N HCl)

② Turk's solution : Glacial acetic acid(적혈구 파괴 시약), Gentian violet CWB(염색), D.W(희석효과)

③ 희석 파이펫에 0.5눈금까지 혈액 흡입. 11까지 희석액 흡입 (20:1 희석)

④ 계산 : W × 10 × 20 × 1/4 = W × 50 = 1mm3(㎕)

* 계산 후 12개 이상 차이시 다시 조작(×100검경)

⑤ 정상치 : 성인 4000~10000/mm3, 어린이 9000~40000개/mm3

cf> 희석 pipette - 혈구 희석 또는 일정량(20㎕)의 혈액채취를 목적으로 만들어진 pipette

파이펫 세척 방법 : D.W → Alcohol → Ether(Acetone)

⑥ 유핵 적혈구에 대한 보정

100

Corrected WBCs = uncorrected WBCs × ---------------------------

100WBCs + nRBCs

http://m.cafe.daum.net/laboratoryseouhealth/Tk3L/15?listURI=%2Flaboratoryseouhealth%2F_rec%3FboardType%3DM

혈액학 과제

14102946 4학년 김동윤

준비물 : microHematocrit - Capillary tube , 란셋 , 알코올솜 , Sigillum Wax , 실험용 장갑

원리.방법.결과

실험 원리 : 란셋으로 손가락 채혈후 microHematocrit - Capillary tube

흡인후 Hematocrit (적혈구 용적률) 보기 위한 실험

방법

00) Capillary tube를 꺼낸후 , 알코올솜을 준비한다

01) Capillary tube가 땅에 떨어지거나 항응고제 부위가 바닥에 닿지않도록 주의

02) 알코올솜으로 란셋하고자하는 부위를 닦아준다.

03) 란셋을 이용하여 손가락을 채혈한다

04) 알코올솜으로 첫 번째 피는 닦아준다

05) 채혈부위를 적정량의 blood를 내준후 Capillary tube 항응고제있는 부위에 흡인시킨다.

06) 2/3 , 1/2 정도로 Capillary tube에 blood를 넣어준다.

07) 알코올솜으로 지혈을 시켜준다

08) 란셋은 의료폐기물통에 넣어주고 정리한다.

09) Capillary tube를 흡인한곳 반대편에 Sigillum Wax를 넣어준다

10) Capillary tube를 수직으로 세워둔후 Hematocrit를 관찰한다

결과

Red – heparine      blue – plain

결과값 정상범위//

남자: 42-52% 여자: 37-45

어쨌든 EDTA튜브는 안에 EDTA라는 항응고제가 들어가 있고요, 말그대로 피가 응고가 되지 않게 합니다. 따라서 피속에 있는 적혈구, 백혈구, 혈소판 등 고형성분(세포)을 조사하기 위해서는 이 tube를 서야 됩니다.

파 란색뚜껑의 Sod citrate도 항응고제로 역시 피가 응고되지 않게 하지만 세포를 조사하는 것이 아니라 주로는 혈액의 응고검사에 사용됩니다. 그 튜브를 자세히 보면 밑에 250uL 정도의 액상의 물질이 있고요, 위쪽으로는 검은색의 marking된 표시선이 보일 겁니다. 반드시 여기선까지 채혈해야 됩니다. 그래야 혈액의 정확한 응고검사결과를 얻을 수 있습니다.

노 란색 튜브는 항응고제가 없습니다. 여기서는 고형성분을 보는 것이 아니라 액상성분에 무엇이 들었는지를 보기 위함으로 일부로 응고를 시키고 난후에 원심분리를 돌리면 고형성분은 가라앉고 위에 뜬 노란 혈청을 가지고 검사가 이루어 집니다, 대부분의 검사는 혈청으로 합니다.

등등

검체가 EDTA whole blood이면 EDTA tube를 사용하여야 하고,

Sod citrate plasma(혈장)이면 sodium citrate tube를 사용하여야 하며,

Serum이면 yellow SST tube나 plain tube를 사용하여야 하며,

Gas분석이라면 heparinized plasma를 사용합니다.

CSF는 대개 일반 plain tube를 사용합니다.

진공튜브 순서

blood culture tube

citrate tube

SST tube

Plain tube

Heparin tube

EDTA tube

Glucose tube

1.     채혈

1)     환자준비

-       금식이 필요한 검사(콜레스테롤, 혈당검사 등)가 처방된 환자인 경우 8 시간이상 공복을 유지 하였는지 확인하여야 한다.

식사 후 변동을 가져올 수 있는 항목

* Glucose

* Lipid battery

* Cholesterol

* Triglyceride

* HDL-cholesterol

* LDL-cholesterol

* Iron, TIBC

* Alkaline phosphatase

고단백을 섭취했을 경우(12시간 이상 금식)

* Uric acid

* Phosphorous

기타 금지식품

* 커피, 음주, 흡연, 복용약물 등도 흔히 검사에 영향을 미친다.

약물검사

* 약물 투여 전에 채혈

* 독성농도를 알기 위해선 약물 투여 후 2시간 후 채혈을 해야 한다.

-       특정 음식물(또는 약물)등의 섭취를 금해야 하는 검사 처방인지를 확인 후 채혈해야 한다.

-       채혈하기 전 환자에게 채혈 할 것을 설명해야 하며 환자의 이름을 물어서 확인한다.

-       채혈하고자 하는 환자의 RFID band와 name card을 반드시 확인해야 한다.

-       환자가 확인된 다음에는 바코드가 부착된 튜브의 정보를 다시 한 번 확인한다.

-       환자의 팔을 책상 위(심장 위치와 같은)에 올려놓고 힘을 뺀 상태로 손바닥이 위를 향하게(supination)하며, 주관절은 되도록 신전상태가 되어야 하며 경우에 따라서는 팔꿈치 밑에 받을 만한 물건을 놓아 주는 것이 좋다.

-       정맥주사용 주사제를 맞고 있는 경우는 반대쪽 혈관을 이용해야 한다.

-       혈액응고검사가 있는 경우 수액(생리적 항응고제등)을 맞고 있는 쪽에서는 절대로 채혈을 하여서는 안되며, 조직액이 삽입될 수 있으므로 채혈 시 첫 번째 튜브로 검체를 삽입하여서는 안 된다.

-       채혈을 마친 후 환자와 검체를 다시 한번 확인하여야 한다.

2)     정맥주사를 맞고 있는 라인에서 채혈을 해야 하는 경우에는 fluid 주입을 막은 상태에서 먼저 충분한 양(약 30 ㎖ 정도)의 혈액을 빼 낸 후 혈액을 채취한 후 바코드가 부착된 튜브에 검체를 담아야 한다.

3)     주사기 준비

-       주사기를 사용할 경우 주사바늘 뚜껑이 닫힌 채로 주사기 몸체와 바르게 결합되어 있는지 확인한 다음 플런저를 한 번 살짝 잡아당겨 보아 부드럽게 움직이는지 확인한다.

-       다량의 혈액을 주사기로 이용할 경우 진공채혈 주사기나 나비바늘을 이용한다.

4)     채혈시기

-       의심되는 질환의 진단 가능성이 가장 높은 상태에서 채혈해야 한다.

-       발열기 채혈

가)   말라리아 진단을 위한 혈액도말

나)   아급성 심내막염 진단을 위한 혈액배양의 경우

-       식이에 영향을 받는 혈당이나 중성지방검사는 식전에 채혈

-       일중변동이 있는 호르몬 검사

-       투약시간과의 연관성이 중요한 약물검사

-       일상뇨검사 : 아침 첫 소변(중간소변)

-       호르몬이나 단백질, 전해질 정량을 검사하기 위한 24시간 뇨검사 : 첫날 오전 7시에 방광을 완전히 비우고 나서 수집을 시작하여 다음날 오전 7시의 마지막 요까지 완전하게 모아야 한다.

5)     채혈

-       구혈대(Tourniguet)을 상박둘레에 맨다.  구혈대는 한번만 잡아 당기면 잘 풀릴 수 있게 묶는다.

-       채혈하고자 하는 위치에서 10㎝ 이상 떨어진 곳에 묶어야 한다.

-       육안적으로 확인하고 촉진으로 확인하여 적당한 정맥을 고른다. 좀더 쉽게 정맥이 부풀어 오르게 하려면 환자는 주먹을 몇 번 쥐었다 편다.

-       알코올 솜으로 여러 번 문질러 천자할 부위를 닦아내고 알코올이 마르도록 잠시 내버려 둔다.( 30-60 seconds)

-       구혈대는 2분 이상 묶지 말아야 하며, 2분내 채혈을 마치지 못한 경우 구혈대를 풀었다 다시 묶어 주어야 한다.

-       구혈대를 6분 이상 둔 경우 아래와 같은 상황이 발생된다.

가)   Hemoconcentration

     – 너무 오랫동안 구혈대(Tourniguet)를 묶거나 너무 세게 묶었을 경우

나)   구혈대(Tourniguet)를 6분 이상 묶었을 경우:

  Enzymes, bilirubin, albumin, total protein, cholesterol  (6-10% 증가)

  Triglycerides, iron, calcium, RBC, hemoglobin  (3-6% 증가)

Potassium, Chloride, Creatinine, Urea, Glucose, Leukocytes, Inorganic phosphate (5% 감소)

다)   구혈대(Tourniguet)를 5 분 묶었을 경우:  Cholesterol 5-20% 증가

-       진공채혈관을 이용한 정맥천자

①  바늘 (vacutainer needle)의 녹색부위를 왼손으로 잡고 오른손으로 위의 반투명한 뚜껑을 돌려 제거하면 adapter 속으로 들어갈 고무로 피막 된 짧은 바늘이 나타나는데, adapter의 좁은 쪽 입구로 돌려 끼워 넣어 움직이지 않도록 고정시킨다.

②  진공채혈관을 고무뚜껑이 짧은 바늘 쪽으로 향하도록 adapter의 큰 쪽 입구를 통해 넣되 고무뚜껑이 바늘에 찔리지 않도록 느슨하게 둔다.

③   주사기를 사용할 때와 같은 요령으로 정맥을 찾아 찌르면 감각으로 정맥에 바늘이 들어갔다는 것을 알 수 있으며, 이때 주사기를 지지하던 요령으로 왼손을 사용하여 adapter를 지지하고 주사기의 플런지를 당기던 것과는 반대로 이번에는 오른손 인지와 중지 사이에 adapter를 끼우고 엄지손가락으로 진공채혈관을 작은 바늘 쪽으로 힘껏 밀어 넣어 뚜껑이 바늘에 의해 뚫림과 동시에 혈액이 채혈관 안으로 채취된다.

④   진공채혈관은 목적에 따라 적당한 압력으로 내압이 조정되어 있으므로 일정량의 혈액이 얻어지면 더 이상 혈액이 나오지 않는다. 따라서 이때 왼손은 그대로 두고 가볍게 채혈관을 adapter로부터 분리하면 된다.

⑤  채혈을 더 할 것이면 새로운 진공채혈관만 adapter 속으로 넣고 힘껏 밀어 주면 된다.  채혈관을 10회 이상 뒤집어 항응고제가 섞이게 한다.

⑥  채혈관은 반드시 labeling이 되어 있는 것을 사용하여야 하며 채혈되는 동안 이름을 확인할 수 있어 매 튜브마다 확인해야 한다.

-       튜브별 채혈하는 순서는 아래와 같다.                 

-       일반적인 채혈순서

혈액배양용기 -> 청색마개(Citrate bottle)-> 붉은색마개(항응고체 불포함 SST bottle & XM Blood bank bottle(Plain bottle)) ->녹색마개 (Heparin bottle) -> 보라색마개(EDTA) 처방 순으로 채혈해야 한다.

-       ESR Tube & Fluoride Oxalate Tube는 현재 원내에서는 사용하지 않으나 필요에 의해 선택적으로 사용할 수 있다.

* 뇌척수액 수집 시

첫 번째 나온 뇌척수액은 화학 및 면역혈청용에 검사 bottle에 담아야 한다.

두 번째 나온 뇌척수액은 세균검사용으로 사용한다.

세 번째로 나온 뇌척수액은 세포 수 산정 및 감별에 담아야 한다.

-       채혈을 마친 튜브는 튜브별 특징에 맞게 mix하여야 한다.

가)   Mixing 목적은 각 tube 안에 포함된 일정량의 시약 함유되어 있는 것을 mixing을 통해 tube 내 혈액과 잘 혼합 되어 원활한 작용 유도한다.

나) Mixing 시기 : 채혈 후 곧바로 부드럽게 시행

다) Mixing 방법 :Tube를 똑바로 잡고 180° 아래로 내려 들어 올리면 1회 실시, 각 검사 tube별로  mixing 횟수를 반복

라)   부적절한 Mixing으로 인한 문제 : EDTA, Sodium citrate, Heparin tube- Clot , SSTII tube – 응고가 덜된 상태 발생

마)   채혈량 : CLSI Guidelines 에 따른 허용량

A.            Tube label에 표시된 Blood Volume의 ±10% 정도.

즉 5ml의 vacuum tube는 4.5~5.5ml까지 가능

B.            SST tube -  minimum 채혈 용적의 50%은 채워야 함

C.            S/C tube (Sodium citrate)-  2.7cc 100% 혈액량이 반드시 필요

D.            KEDTA tube -  용적의 50% 이하이면 과다 항응고제에 의한 혈구수와    

Hematocrit 수치 감소, cell morphology와 염색에 변화가 일어남.

2.     뒤처리

-       주사기 사용 후 주사기 뚜껑은 recapping 을 해서는 안 된다.

-       사용한 needle은 주사침통에 넣어 폐기물 처리되어야 한다.

3.     검체 운반

-       채혈을 마친 검체는 검체운반 box에 넣은 후 진단검사의학과 내 접수로 신속히 보내져야 한다.

-       응급 및 혈액은행 검체는 1층 채혈실을 통해 응급검사실과 혈액은행에서 검체를 처리한다.

-       토요일 검체(13:00)는 모두 1층 채혈실로 검체를 내려야 하며 검체를 받은 진단검사의학과 직원은 검체보관 규정에 의해 검체를 보관하여야 한다.

-       토요일 13:00 이후 응급 검체가 아닌 검체는 각 병동에서 냉장보관 후 진단검사의학과로 월요일에 내려야 하며, 검체를 반드시 분리를 해야 하는 경우는 1층 혈액은행이나 기타 응급검사실로 검체를 내려 분리 요청 후 진단검사의학과 내에 냉장보관 하여야 한다.

* 채혈 후 반드시 분리 보관해야 하는 검사항목

가) FDP(B161)

나) ACTH(B60D59)

다) Renin(B60D7)

라) Aldosterol(B60D8)

마) BNP(B60Q32)

바) Plasma Hemoglobin(B293)

사) ADH(B60D80)

       아) Lupus anticoagulant(B1711, B1712)

<출처 : 가천의과대학 길병원 채혈과정 - 진단검사의학과>

시험관 준비

피부소독 후 알코올이 마르는 동안 시험관을 준비한다. 채혈할 정맥을 알고 있으니 거기 에 맞는 크기로 주사침을 준비한다. 시험관 순서 (order of draw)대로 잡기 쉬운 위치에 시험관을 놓아 둔다. Plain(빨강) → Citrate(남) → SST(노란) → PST(녹) → Heparin (초록) → EDTA(보라) 이때 시험관 첨가제가 시험관 마개에 붙어 있는 것이 보이면 손으 로 가볍게 툭툭 쳐서 시험관 바닥으로 떨어지게 한다.

7. 채혈에 의한 합병증

1) 혈종(Hematoma)

천자부위의 피부가 부어 오르면 혈종이 생긴 것이 거의 틀림없다. 환자는 아프다고 호소 하게 된다. 환자에게는 2~3일 정도 천자부위에 멍이 들 것이라고 설명하고 안심시킨다. 혈종 으로 인해 채혈을 제대로 수행하지 못하였다면 다른 부위에서 채혈을 마치도록 한다.

2) 통증

환자가 안심한 상태에서 어느 정도 아플 수 있다는 것을 각오하고 있으면 실제 주사침이 들 어와도 덜 아프게 느껴진다. 알코올 소독제가 덜 마른 상태에서 주사침을 찌르면 쏘는 듯한 통증을 느끼게 된다. 만약 환자가 비명을 지를 정도로 심한 통증을 호소하면 신경을 찔 렀을 가능성이 있는 것이므로 재빨리 주사침을 빼야 한다

3) 신경 손상

무척 심한 통증이 유발된다. 이리저리 주사침을 깊이 찔러 보는 경우 또는 환자가 갑자기 팔 을 움직이는 경우에 생길 수 있으니 채혈 시에는 왼손으로 팔을 잘 고정해야 한다. 주사침에 의해 신경이 손상되면 환자는 팔 아래쪽으로 퍼져 내려가는 심한 통증을 느끼며 팔이 저리다 고 (numbness) 호소한다. 신경을 찔렀다고 생각되면 재빨리 주사침을 빼야 한다.

4) 정맥 손상

같은 자리에서 너무 자주 정맥 천자를 시행하면 정맥이 손상 받을 수 있다. 주사침을 이 리저리 찔러보다 정맥을 터지게 하는 경우에도 마찬가지다. 그런 경우 터진 정맥이 아물면서 딱딱해지고 혈액 흐름이 거의 없어지게 된다.

5) 감염

천자 부위가 감염되는 경우는 매우 드물다. 그러나 채혈 부위의 소독을 불충분하게 하거나 소독되지 않은 장갑 끝으로 다시 만지면 감염 가능성이 있게 되므로 조심해야 한다. 주사침 뚜껑을 벗긴 후 오래 동안 들고 있거나, 채혈 후 붙여 줄 접착 밴드를 미리 열어 두거나 하 면 공기 중의 미생물에 오염될 수 있으므로 주의해야 한다

6) 실수에 의한 동맥 천자

특히 basilic vein이 있는 부위 바로 밑에 brachial artery가 위치하고 있으므로 조심해야 한 다. 만약 깊게 찌르다 동맥압이 느껴지는 선홍색의 동맥피가 나오는 것을 확인하면 즉시 주 사침을 빼고 5분 이상 압박 지혈해야 한다.

7) 의원성 빈혈(latrogenic Anemia)

신생아 또는 소아에서 빈번한 채혈에 의해 유발되는 빈혈을 말한다. 이 때문에 수혈이 필요 한 경우도 있을 수 있다. 신생아의 총혈액량은 80mL/kg이므로 만약 신생아의 체중이 3kg라 면 총혈액량은 250ml이다. 이 경우 총혈액량의 10%, 즉 24mL 이상의 혈액을 한번에 뽑아 내면 위험하다. 신생아에서 채혈한 경우에는 그때마다 채혈량을 기록해 두어야 한다.

8) 시험관 혈액의 역류

Vacutainer를 이용해서 채혈할 경우 진공시험관 속에 채혈되었던 혈액이 역류하여 다시 정맥 속으로 들어가는 일이 생길 수 있으므로 조심해야 한다. 어떤 환자는 시험관 속의 첨가제, 특 히 EDTA가 섞인 혈액이 들어가면 부작용이 일어날 수 있다. 이것을 예방하려면 환자의 팔이 하향자세를 취하게 해서 시험관 바닥이 아래 쪽에 있도록 해야 한다. 그리고 시험관속에 채 혈된 혈액이 앞뒤로 왔다갔다 하지 않도록 해야 한다. 시험관 속의 진공이 다 소모된 후에는 다시 역류될 수 있기 때문에 즉시 시험관을 홀더에서 빼내야 한다.

9) 혈전 형성

동맥 천자에 의해 동맥의 내벽이 손상을 받으면 그 부위에 혈전(thrombus) 이 생길 수 있다. 심하면 혈전이 점차 커져서 동맥 내강을 모두 막아 버리는 경우도 생길 수 있다. 그래서 이 런 만일의 경우에 대비하기 위해 radial artery에서 천자하기 전에 반드시 ulnar artery collateral circulation이 좋은지를 확인해야 하는 것이다. 혈전이 떨어져 나간 후 더 아래 부 분의 혈관을 막아 색전증(embolism)을 일으킬 수도 있다.

<출처 : 을지대학병원 진단검사의학과>

일반적인 채혈순서는 혈액배양용기, 항응고제가 없는 plain tube(붉은색마개), sodium citrate(청색마개), heparin(녹색마개), EDTA용기(보라색마개)의 순으로 검체를 담는다. heparin 용기에 담은 후 같은 주사바늘로 citrate용기에 담으면 aPTT가 위연장될 수 있고, EDTA용기에 담은 후 같은 주사바늘로 plain tube에 담으면 EDTA 성분에 따라 sodium 또는 potassium이 높게 측정되는 오류가 있을 수 있다

<출처 : 다음까페 임상병리과자료실>

주사침으로 피부를 찌를 때 유리되어 나온 tissue thromboplastin으로 인해 오염이 될 수 있으므로 plain튜브를 먼저 채혈하며 다른 첨가제가 혼입되는 것을 예방하기 위해 첨가제가 들어있는 튜브 중에서 맨 처음 시행한다. 항응고제와의 비율을 정확히 1:9로 하기 때문에 튜브 상단의 표시선까지 샘플을 해야 한다. 항응고제가 들어가기 때문에 응고되지 않게 유의하며, 다른 종류의 튜브에서 샘플을 나누지 않도록 한다.