Agarose gel 제작

Agarose gel은 전기영동에 쓰이는 것으로 DNA가 이동하는 매질의 역할을 한다.

DNA를 고정하는 능력이 우수하여 DNA를 분자량에 따라 분리해내기가 용이하다.

 

제조 준비

 

① 1 × TAE Buffer, Ethidium, Agarose

② 전자레인지, 방열장갑, 수평계

 

제조 과정

1. 제조과정에 쓰일 물품들을 3차 증류수로 깨끗이 씻어준 후 닦는다.

2. Buffer를 비커에 넣고 Buffer 무게의 1/100에 해당하는 Agarose를 비커에 넣는다.

→ 이 때 Gel에 들어가는 성분들의 비율은 다음과 같다.

1 × TAE buffer	Ethidiun Bromide	Agarose
100㎖	4㎕	1g
50㎖	2㎕	0.50g
25㎖	1㎕	0.25g

 3. 2의 삼각플라스크를 전자레인지에서 가열한다. 5초 혹은 10초 간격으로(비커 안의 내용물이 끓어 넘치지 않을 정도의 시간) 삼각플라스크를 꺼내서 플라스크를 바닥에 닿게 하여 천천히 돌려주면서 식힌다. 살짝 식으면 다시 집어넣고 내용물이 투명 해 질 때까지 반복한다.

4. 3의 과정이 끝난 플라스크에 Etidium Bromide의 정량을 집어 넣는다. 

5. Gel 주형틀의 수평을 맞추고 Gel을 붙는다. 

6. Kimps등의 실험용 휴지로 위를 덮어서 먼지가 내려앉지 않게 한다.